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二手液相色谱法不受分析对象的挥发性和热稳定性的限制,弥补了气相色谱法的不足。在已知的有机化合物中,气相色谱法可分析约20%,液相色谱法可分析约80%。液相色谱法在药物含量测定、成分分析、质量控制等方面有着广泛的应用。近年来,液相色谱在药物分析应用中发挥着重要作用。

 

二手液相色谱法在天然药物和复方药物分析中的应用

ELSD可用于无紫外吸收或紫外末端吸收较弱的样品的测定。毫无疑问,天然产物中的许多成分都可以直接、准确地测定。ELSD在天然产物及其复方药物分析中的应用主要包括皂苷类、生物碱类、萜类、内酯类等,没有紫外吸收或只有皂苷的末端吸收。ELSD无需衍生化即可检测皂苷。Zui在高效液相色谱-蒸发光散射检测中的应用已被广泛报道。主要包括天然人参、生脉散、愈精胶囊中多种人参皂苷的一次性分离分析;西洋参中人参皂苷和仿人参皂苷的定量测定;三七中人参皂苷的含量分析;黄芪的分离测定,保元汤中黄芪注射液及黄芪甲苷、黄芪甲苷;麦冬中甾体皂苷;天麻中天麻素含量测定等。本研究以CL8柱、乙腈和水为流动相,不经衍生化测定多组分含量。结果表明,该方法灵敏度高(一般检测限小于3μg/M1),线性关系好。对于无紫外吸收的生物碱,ELSD具有操作简单、灵敏度高等优点。与高效液相色谱-紫外分光光度法测定贝母中甾体生物碱相比,ELSD检测器不仅可以提高无衍生化测定结果的准确性,而且可以检测无双键的生物碱。对于河豚毒素等动物中的生物碱,不存在紫外吸收和低安全性,因此不适于衍生化。采用ELSD法可获得满意的检测结果。银杏叶是一种保健药,其主要活性成分为黄酮类和萜类内酯。以往银杏中萜类内酯的测定主要采用高效液相色谱-紫外分光光度法和HPLC-ri法。但由于萜类内酯类化合物的紫外吸收差,且受少量物质的干扰,结果的稳定性和准确性较差。随着ELSD的发展和普及,这些方法逐渐被ELSD所取代。

二手液相色谱法在抗生素分析中的应用

在生产抗生素时,首先要了解发酵液中主体和副产物的存在。如青霉素、四环素、头孢菌素、红霉素、柔红霉素、庆大霉素等的发酵产物,可用C18柱、甲醇和缓冲液配制的流动相或离子对法进行分析。测定普鲁卡因酰胺和茶碱的主要含量,测定硝酸甘油及其降解产物的主要含量,保证药物的热稳定性。

二手液相色谱作为常规分析方法在药物分析中的应用

液相色谱法作为药物分析中的zui主要的分析方法,常被作为常规分析和检验方法。近年来在这个方面的研究比较多,刘树业等为时刻监控治疗肝癌时的抗癌药物剂量即血中的药物浓度,提高疗效,减少副作用,采用紫外-HPLC法对血中和组织中的阿霉素浓度进行分析。用UV-240紫外分光光度计,BECKMAN332型液相色谱仪,采用反向色谱法。针对近几年国际奥委会医学委员会公布的禁用表中新增药物及一系列利尿剂的相关化合物进行了研究,比较了不同的提取方法及回收率,研究了几种药物的排泄情况;建立了同时分析13种利尿剂的液相色谱测定方法,检出限小于5ng。用0.02mol/L的三羟甲基胺基甲烷(用磷酸调pH值至7)和甲醇(含2%乙酸和0.25%庚烷磺酸钠)作流动相进行梯度洗脱,建立了脂性油膏药物中黄芩甙含量的反相液相色谱分析方法,本法分析速度快,重现性好,黄芩甙的平均回收率为103.7%。

二手液相色谱在药物残留测定上的应用

由于液相色谱能够对含量复杂组分进行定量分析,被广泛使用于药物残留的测定上。以液相色谱法建立了猪、羊、鸡肝组织中西维因残留量的检测方法。采用ODS色谱柱,二极管阵列检测器,甲醇/水(65/35)为流动相,222nm检测波长下进行检测。西维因对照品溶液的zui低检测限为0.1mg/L,线性范围为0.1~20mg/L,标准曲线回归方程为:y=-22459.83+454684.31x,线性关系良好(r=0.9999)。样品以乙腈提取,并加入无水硫酸钠和正已烷,过滤后去除杂质,乙腈层在45~50℃下水浴氮气吹干,残渣用甲醇溶解后,进样分析。平均回收率均大于80%,日间和日内变异系数均小于10%。符合药物残留痕量分析要求。研究了动物源性食品中甲氧苄胺嘧啶药物残留的提取、净化和液相色谱分析条件,建立了液相色谱法测定动物性食品中甲氧苄胺嘧啶药物残留的方法,该法检测限0.025mg/kg,回收率为84%~98%。此外,在人血中药物含量的测定中也有很多的应用。建立了血浆及尿液中异烟肼的液相色谱快速测定方法,以满足临床药物分析和法医学鉴定的需要,提高对血浆及尿液中异烟肼浓度检测的准确性。以香草醛为衍生化试剂,将异烟肼经柱前衍生为异烟肼香草醛腙,直接对处理后样品中的腙进行定性、定量分析。以在空白人体液样本中定量添加标准异烟肼的方法考察了样品的前处理方法、仪器条件、线性范围、精密度、回收率等,并对健康受试者血液中的异烟肼浓度进行了监测。